技术原理

技术原理 原位测序技术 (In Situ Sequencing,ISS) 依赖于双连接和滚环扩增技术，它是以缺口靶向(Gap-targeted Sequencing) 或条形码靶向 (Barcode-targeted Sequencing) 为测序策略，同时引入边连接边测序的化学原理（Sequencing-by-ligation Chemistry)，以滚环扩增产物为测序媒介进而在组织或细胞原位对RNA实现短片段测序的技术。

技术流程

(1)定制探针：针对用户提供的基因的非保守区设计探针并合成

(2)样本前处理：将冰冻切片退冻、固定、脱水和透化，以便探针和反应所需的酶等成分进入组织细胞内部

(3)探针杂交与滚环扩增：探针与RNA杂交，之后连接成环；通过滚环扩增反应放大编码信号

(4)原位成像：利用边合成边测序的化学原理，通过采集荧光信号得到对应位置的编码碱基；经过序列解码，可识别出该位置靶向结合的基因

(5)图像分析：获得每个靶基因在组织中的空间表达位置，用不同符号(或颜色)标记在同一张组织图像中；通过细胞边界识别等方法得到单细胞水平的基因表达定量数据，可进行高级分析

产品优势

(1)高效、特异、高敏

(2)高信噪比

(3)可实现256种靶标分子检测

(4)亚细胞分辨率

技术优势

1. 冷冻组织OCT包埋样本或者切片
2. 石蜡包埋组织样本或者切片（FFPE样本） 
3. 细胞爬片样本等